Репродуктивний і респіраторний синдром свиней (ррсс)
Репродуктивний і респіраторний синдром свиней (РРСС, "синє вухо, блакитний аборт", епізоотичний пізній аборт свиней) -це вірусне контагіозне захворювання головним чином свиноматок, що характеризується абортами, наявністю мертвонароджених поросят, передчасними опоросами або затримкою опоросу, респіраторними порушеннями, появою фарбування шкіри вух та інших органів. З 1987 р в багатьох свинарських господарствах США і Канади реєструється патологія відтворення свиней, що характеризується пізніми абортами, народженням мертвих, нежиттєздатних або потворних поросят і ураженням органів дихання. РРСС викликається артерівірусом. Захворювання з`явилося в кінці 1980-х рр. в Північній Америці, потім в Європі. В даний час РРСС є ендемічним для багатьох регіонів світу. Хвороба відрізняється великою різноманітністю ознак, які визначаються багато в чому загальним станом здоров`я тварини. При інтродукції внеінфіцірованное стадо інфекція завдає великих економічних збитків, але скоро переходить в помірну або навіть інаппарантную форму. У ендемічної формі вірус продовжує довгий час циркулювати в стаді. Протягом багатьох тижнів персистирует виремия. Вірус схильний до макрофагів і не розмножується в більшості клітинних ліній, відрізняється надзвичайною генетичної і АГ-варіабельністю. Спочатку це захворювання отримало назву "таємнича хвороба свиней" У 1991 р були опубліковані повідомлення про появу аналогічного захворювання свиней в країнах Європи. При цьому вченим з Центрального ветеринарного інституту в Нідерландах був виділений новий вірус, який назвали «вірус Лелейстад». Вірус Лелейстад це РНК-, оболончатий вірус, віднесений до роду артерівірусов. Для виключення різночитання цієї хвороби в різних країнах світу, сесія МЕБ (квітень 1991 г.) і 2-й Міжнародний симпозіум в США (1992) прийняли єдину назву - репродуктивний респіраторний синдром свиней (РРСС), або PRRS в латинській транскрипції.
Поширення хвороби. В даний час можна говорити про панзоотій РРСС, хоча багато ще не відомо про її світовому поширенні. Багато країн не можуть лабораторно діагностувати хворобу або не хочуть повідомляти про її появу. На американському континенті про хвороби повідомляли США і Канада. У США існують чіткі статистичні дані через хворобу. Є дані про її наявність в 19 штатах. Моррісон з співр. повідомили про ретроспективному виявленні 364 стад тварин, що позитивно реагують на РРСС на підставі серологічних досліджень тільки в 7-ми свинарських штатах (Айова, Іллінойс, Індіана, Мічиган, Небраска і Північна Кароліна). У Канаді повідомлення підтверджені серологічно в 2-х штатах: Онтаріо і Квебек. В Європі найбільше поширення хвороби відзначали в свинарському поясі, що охоплює західні землі Німеччини, Нідерландів та Бельгії. У Бельгії найбільшу кількість спалахів хвороби реєстрували в квітні 1991 р свинарських господарствах Франції РРСС - нове захворювання, яке викликається у свиней новим вірусом. Виявляється різноманітної сімтоматологіей і супроводжується абортами, мертвонародження і загибеллю поросят, а також на грипоподібні проявами. У Франції РРСС реєстрували на 169 племінних фермах в період з листопада 1991 року по травень 1992 року, головним чином, в провінції Бретань. В Англії хвороба з`явилася в травні 1991 року і широко поширилася в графствах Хамберсайд і Північному Йоркширі, а в подальшому і в Шотландії. Хвороба реєструвалася також в Данії, Іспанії, Голландії та НАО. Мальта виявлені специфічні AT до збудника в пробах крові свиней, що надійшла в діагностичні центри Європи з Італії та Польщі.
Відомості про збудника. Голландським вченим Wensvoort і Terpstra (Центральний ветеринарного інституту г Лелистад) вдалося встановити справжню етіологічну природу цієї хвороби, виділивши вірус, який назвали "агент Лелистад", в культурах легеневих макрофагів свиней. В даний час встановлено, що збудником хвороби є РНК-вірус, який входить в рід артерівірусов.
Морфологія і хімічний склад. Збудник хвороби РНК-вірус розміром 45-65 нм. Він має зовнішню оболонку і чутливий до ліпідним розчинників. За фізико-хімічними властивостями нагадує представників сімейства тогавирусов, роду артерівірусов (вірус артеріїту коней). Віруси РРСС, виділені в Європі (агент Лелистад) і в США (VR-2332), дещо відрізняються за біологічними властивостями, хоча і мають перехресні серологічні зв`язку.
У культурах легеневих макрофагів вірус РРСС викликає ЦПД у вигляді округлення клітин з наступним пікнозом і відділенням від моношару протягом 2-4 діб. Вірус містить РНК і оболонку, здатний реплицироваться в макрофагах і проходити через плаценту, заражаючи плід, може тривалий час персистувати в організмі тварини і викликати повторно імуносупресію. Передається при прямому контакті і респіраторно. Швидко розповсюджувався на фермах. Вірус РРСС проникає трансплацентарно, на що вказує виявлення збудника і специфічних AT у мертвонароджених плодів і живих ослаблених поросят до першого прийому молозива. Plagemann (1992) передбачає, що вірус РРСС належить до нової групи вірусів, що нагадують тоговіруси, але має позитивно закручену РНК і за структурою схожих з корона- і торовірусамі.
Стійкість. Вірус чутливий до зміни рН среди.Оптімум рН від 5 до 7. Benfield et Welson (1992) повідомляли, що вірус SIRS, виділений в США, зберігає інфекційність в гомогенатах уражених легких при-70 ° С протягом 1,5 років, при + 4 ° С - 1 міс, при 37 ° С - 2-х діб. При температурі 55 ° С він інактивується протягом 45 хв. Friey et.al. (1992) виділили вірус з патматеріалу, що зберігався протягом 3-х років в замороженому стані.
AT властивості. Обстежено 4 свинарські ферми на наявність ATк вірусу РРСС за допомогою ІФА протягом 12 тижнів після опоросу. Титр AT у свиноматок зіставляли з титром материнських AT у поросят у віці 2 нед.Матерінскіе AT, виявляли у поросят протягом 4-10 тижнів. ВНА виявили через 12 днів після зараження або 18 днів після контакту з хворими тваринами. Максимальних титрів вони досягали на 40-50-у добу після зараження і зберігалися до 120 днів (термін спостережень).
Культивування. Вірус РРСС успішно репродукується в легеневих альвеолярних макрофагах (АМФ) поросят. Для отримання АМФ використовують 4-6-тижнів поросят, вільних від патогенної мікрофлори ферм. АМФ виділяли 2-кратним промиванням відпрепарованих і ізольованих легких забуферений фізрозчином, що містить антибіотики (пеніцилін, стрептоміцин, неоміцин і амфотерицин), який нагнітали через трахею за допомогою автоматичного шприца з голкою (близько 500 мл). Вибір рідини з легенів, що містить АМФ, проводять зазвичай шприцами через той же отвір. Суспензію клітин з легких центрифугировали при 1500 обор. - 15 хв. При наявності еритроцитів до осаду додавали 0,83% -ний розчин хлориду амонію і після 5-хв інкубації при кімнатній температурі клітини знову центрифугують при тих же умовах. Зараження вірусом РРСС проводили через 2-24 годин після 2-кратної відмивання живильним середовищем і антибіотиками. Облік цитотоксичної дії вірусу проводять через 24, 48, 72, 96 і 120 ч. Культуральне рідина використовують в якості AT ELISA. Титр макрофагального вірусу становив 1: 8-1: 16. Таким чином, АМФ можуть бути використані для препаративної напрацювання вірусу в дослідницьких цілях, виготовлення діагностикумів та виявлення вірусу в патологічних матеріалах.Чувствітельнимі до вірусу РРСС є первинна культура АМФ свиней і клон клітин MARC-145 (клонових варіант, отриманий з перещеплюваної культури клітин МА 104 нирки африканської зеленої мавпи). Максимальне накопичення вірусу відзначали при посівної концентрації 100-120 тис. Клітин / 1 мл з використанням фетальної сироватки і зняття моношару не пізніше 3-4-х діб.
Клінічні ознаки і патологоанатомічні зміни. У свиноматок хвороба починається з тимчасової відмови від корму або гіршою його поїдання. У період абортів відзначають як підвищену до 41,5 ° С, так і знижену температуру тіла. У окремих тварин спостерігають респіраторні порушення і у 1-5% - блакитно-червоне забарвлення шкіри вух, п`ятачка і вульви. Суттєвою ознакою захворювання супоросних свиноматок періоду, близького до опоросу, є аборти і передчасні опороси, що виникають через 2-3 тижнів після виявлення перших симптомів хвороби. За даними англійських вчених, уражені свині на першій стадії хвороби виявляють ознаки інфлюенци, зокрема, високу температуру тіла і важке дихання. Пізніше яскраво-червоні плями з`являються по всьому тілу свині. Через деякий час забарвлення плям змінюється, і вони набувають синій колір. У перші 2 тижні хвороби аборти можуть становити 60-70%, через 3 тижні - 50 і через 18 тижнів - 10%. У природних умовах клініка може значно варіювати від стада до стада і не корелювати з основною вагою репродуктивних порушень. В окремих господарствах кількість абортованих свиней на останній стадії супоросності досягає 100%.
При аналізі 214 уражених господарств в окрузі Мюнстерленд в Німеччині встановлено, що 37% абортів сталося на 100-112 дні, 49% -на 113 дні 14% - на 117-120 дні поросності. Якщо розглядати крайні межі нормальної поросності в 113-117 днів, то запізнілі опороси до 120 днів можуть свідчити про загибель плодів в більш ранньому періоді, обумовлених іншими інфекціями свиней з репродуктивним синдромом, такими як парвовірусна або ентеровірусна. Однак, як правило, муміфікації плодів при гострому перебігу РРСС не спостерігається. В окремих випадках у свиноматок спостерігали залеживанием, хитку ходу, параліч задніх кінцівок або косу постановку голови. Загибель свиноматок не перевищує 2%. Після абортів свиноматки досить швидко одужують і тільки в окремих з них відзначали "післяпологові перейми". Свиноматки повторно приходять в охоту, проте повідомляється про подовженому терміні холостого періоду. У свиноматок, опоросившихся в оптимальні терміни поросності (114,7 ± 1,7 дн) в гострому періоді хвороби до 100% поросят можуть бути мертвонародженими Німецькі автори, опрацювавши велику кількість статистичних показників уражених господарств, встановили, що від хворих свиноматок в пометах налічували 30 -40% мертвонароджених, 30% слабких і 30% зовні здорових поросят. У мертвонароджених поросят спостерігали випуклообразную форму голови, кон`юнктивіти і ураження рогівки очей, підшкірні набряки. Слабкі поросята масою до 1 кг видають страхітливий вереск і стогони, задні кінцівки їх часто витягнуті, і вони не можуть нормально встати на ноги. При хронічному перебігу спостерігають відносний добробут супоросних маток. Через 1-1,5 місяця можливе народження на неблагополучній фермі здорових поросят, але через деякий час знову відзначають аборти. У відгодівельних господарствах хвороба протікає з рядом особливостей: основні клінічні ознаки пов`язані з ураженням органів дихання.
При розтині спостерігають крововиливи і набряки підшкірної клітковини, збільшений вміст рідини в перикардіальної і черевній порожнинах, дистрофію печінки і зміни в легенях. Вони кровенаполнена і частіше мають мозаїчну забарвлення. Слаборозвинені поросята, як правило, гинуть в перші тижні життя. Через 4-6 тижнів захворювання починає набуває хронічного теченіе- спостерігається затримка росту і розвитку, а також підвищена чутливість до секундарная інфекцій. У окремих тварин відзначали негнійний енцефаліт і міокардит. Правда, у більшості поросят їх не виявляли. В цілому патолого анатомічні ознаки не характерні і нагадують такі при бактеріальних інфекціях. У маток з ураженням вух ознак міокардиту не спостерігалося. У хворих тварин в США відсоток ураження серцевого м`яза значно вище, ніж в Німеччині. Нерідко хвороба протікала в змішаній формі, одночасно з грипом, БА, парвовирусной інфекцією.
Експериментальна інфекція. Terpstra і ін .. (1991) проводили досліди по зараженню культуральним вірусом РРСС 8-ми свиноматок на 84-й дн поросності. Тільки у 2-х свиноматок спостерігали 1-дн підвищення температури тіла до 39,6 ° С. У 2-х - почервоніння шкіри вух і прискорене дихання. Одна свиноматка абортованих на 10-й днів поросності і принесла 7 мертвих і 4 живих слаборозвинених поросят. Дві інші опоросились на 116-й і 117-й дн поросності і в пометах виявили 10 живих і 19 мертвонароджених поросят, з яких 5 були муміфікованими Решта 5 свиноматок опоросились на 113-115-й дн поросності без репродуктивних порушень. У пометах було 58 поросят, багато з яких були слаборозвиненими і 26 з них (40%) впали протягом 1-го тижня життя Вірус РРСС було виділено від 31 поросяти (30% інфікованості). При інтратрахеально і внутрішньом`язовому заражених на 2-5-е добу у інфікованих підсвинків спостерігалось незначне (на 0,5-1,5 ° С) підвищення температури тела.У 2-х тварин на 10-12-й день після зараження відзначений кашель. Інших клінічних ознак хвороби не виявлено. Підвищення кількості лейкоцитів в крові було встановлено через добу після зараження тварин і до 4-го дня їх рівень досягав 28-30 тис / мл і зберігався протягом 2-3 тижнів. У підсвинка, який перебував в контакті з зараженими тваринами, підвищення температури тіла відзначено на 18-19-е, а збільшення числа лейкоцитів на 6-ту добу після спільного змісту. На 5 і 14 день після зараження було вбито по одній тварині. При патологоанатомічному дослідженні у них спостерігалися поодинокі вогнища гострої бронхопневмонії. В обох випадках з легких і легеневих альвеолярнихмакрофагів виділено вірус РРСС. В інших внутрішніх органах піддослідних тварин видимих змін не виявлено. При інтраназальному зараженні вірус містить суспензією поросят 4-тижнів віку температура тіла їх підвищувалася до 40,5 ° С, утримуючись на цьому рівні 3 дн, зазначалося прискорене дихання, відмова від корму і загальне пригнічення Підшкірне і внутрішньом`язове введення віруссодержащего матеріалу не викликало у дорослих білих мишей ніякої видимої реакції. Однак та ж суспензія після внутрішньомозкового введення білим мишам викликала поява нервнопаралітичну ознак і їх загибель. З 3-го пасажу загибель мишей наступала через 24 год Вірус № 9-181-93, адаптований до білих мишей, викликав специфічне ЦПД. У 1995 р в Курській області було виділено вірус РРСС, який не викликав ГА еритроцитів і Гад. У тварин, заражених європейським стандартним шт "Лелистад" вірусу РРСС клінічних ознак не відзначалося.
Епізоотологічне характеристика. З епізоотичної точки зору важливим є шлях поширення інфекції. Зокрема, в грудні 1990 р хвороба зареєстрована в Нідерландах. Свинарство в цій країні - одне з найбільш концентрованих в світі, і природно, хвороба дуже швидко поширилася респіраторним шляхом, цілком можливо, в потоках повітря. Імовірно, факторами передачі збудника могли бути і птиці, а також люди і автомобілі (якщо ці об`єкти були в контакті з інфекційним агентом).
Більшість сільськогосподарських виставок та ярмарків з продажу свинопоголів`я в 1991 р в Великобританії були заборонені. За даними Держветслужби цієї країни в даний час немає доказів поширення хвороби повітряним шляхом, і всі випадки занесення збудника пов`язані з пересуванням поросят. Вірус може персистувати в заражених стадах свиней до півроку. Це може бути пов`язано з відсутністю сероконверсии у окремих явно інфікованих тварин. Окремі заражені свиноматки можуть бути джерелом зараження для здорових тварин протягом 99 днів. Англійські дослідники вважають, що стада свиней залишаються зараженими протягом 2-х місяців після припинення появи явних клінічних ознак хвороби. Зазначене прямо пов`язано з виробничими показниками уражених РРСС племінних ферм свиней. На невеликих фермах на 50-200 свиноматок в період гострого перебігу хвороби недоотримують понад 50% поросят.
У нашій країні в 1991-1993 рр. в ряді господарств виявлено масові випадки абортів, народження мертвих і слабких поросят, респіраторні розлади. У 1993 г.в Голландію було направлено 40 проб сироваток крові від свиноматок з порушеннями репродуктивної функції з 10 господарств для дослідження на наявність AT до вірусу репродуктивного та респіраторного синдрому. У всіх 10 обстежених господарствах виявлені позитивно реагують свиноматки. З 40 досліджених проб сироваток крові 38 виявилися позитивними, причому більша частина сироваток (72,5%) містила специфічні AT в високих титрах (1: 640 і вище). Високий відсоток позитивних сироваток свідчить про широку циркуляції вірусу в досліджуваних свинарських господарствах. Вірус РРСС, ймовірно, має імунодепресивними властивостями. Американськими дослідниками встановлено зменшення числа альвеолярнихмакрофагів і порушення їх функції уінфіцірованних поросят. Макрофаги відіграють важливу роль в індукції AT освіти-вони передають агент Т-і В-лімфоцитів. Розвиток респіраторного синдрому, мабуть, обумовлено вторинними бактеріальними інфекціями після розмноження вірусу в альвеолярних макрофагах і порушення імунної системи легень.
діагноз на РРСС ставлять на підставі клініко-епізоотологічних даних і результатів лабораторних досліджень. Для виділення вірусу використовують сироватку або плазму крові хворих і полеглих поросят, проби легень, селезінки, плевральної і перикардіальної рідини. Виділення вірусу проводять в культурах альвеолярнихмакрофагів, отриманих від молодих (6-8 тижнів) СПФ-поросят. Успіх голландських вчених і пояснюється перш за все тим, що вони використовували цю культуру, в той час як культури клітин РК-2, РК-15 і К-6 виявилися не чутливими для виділення збудника. Ідентифікацію збудника проводять за фізико-хімічними серологічним властивостям. З серологічних методів використовують спочатку непрямий метод ІФ і прямий метод ІФА В США для ідентифікації збудника використовували РН, розроблену з цим вірусом в університеті штату Міннесота, а також ІФ та ІФА, розроблені в національній лабораторії Ames в шт. Айова. У Франції розроблений непрямий метод ІФА для виявлення специфічних AT.Сероконверсія в діагностичних титрах (1:20 і вище) розвивається до 14-му та після експериментального інфікування, а до 28-му дн титри антитіл накопичуються до 1: 1280. Розроблено методику очищення і концентрування культурального вірусу РРСС, репродукованого в культурі клітин МАРС-145 і FL.Предварітельно віруссодержащего суспензія очищається від баластних білків низькошвидкісним центрифугуванням, потім концентрується 2-кратним осадженням ПЕГ мовляв м. 6000 і очищається високошвидкісним центрифугуванням (7000 хв-1 в протягом 6 год). У градієнті щільності CsCl-сахарози матеріал концентрували в 100 разів. Очищення становила 96,5%. Всі етапи підготовки препаратів контролювали за активністю в ІФА. Високо специфічні активні препарати АГ вірусу РРСС використовують для виготовлення AT діагностикумів для ІФА. Метод непрямої ІФА простіший і його можна використовувати в польових условіях.Достаточно досліджувати з стада 10 проб сироваток, (краще парних), щоб суверенністю поставити лабораторний діагноз.
В Англії практикується збір з 12-15 пар сироваток від підозрюваного стада. Служба діагностики на РРСС в цій країні діє з квітня 1992 р Досліджено вже 118 стад і було виявлено 31 стадо, позитивно реагує на РРСС. При серологічному дослідженні хибнопозитивні реакції, як правило, відсутні, хоча хибнонегативні є звичайними і досягають 25%. Benfieldet. al. (1992) повідомляли про використання монАТ в ІФ при ідентифікації європейських, американських і канадських штамів збудника РРСС. У РФ розроблений твердофазний ІФА, для проведення діагностики РРСС, складені набори діагностикумів для виявлення РРСС і специфічних AT. МонАТ до вірусу РРСС можуть бути використані як для виявлення АГ вірусу РРСС в патологічному матеріалі, так і для визначення AT в сироватках крові свиней, так як вони дають більш специфічну реакцію в порівнянні з поліАТ.
При диференціальної діагностики необхідно виключити вірусні та бактеріальні хвороби, що протікають з порушеннями в репродуктивних системах, а також отруєння. Виключають насамперед АЧС, КЧС, БА, грип свиней, ЕМК, ПАРВОВІРУСНИЙ хвороба, ТГЕ, лептоспіроз і хламідіоз. Характерною особливістю цієї хвороби є загострення вторинних і хронічно протікають інфекцій, збудники яких можуть таємно циркулювати в уражених стадах свиней. Це ще більше ускладнює проведення лабораторної диференціальної діагностики.
імунітет. Після того, що хворіє більша частина свиноматок виявляються імунними до повторного інфікування. AT до вірусу РРСС, які виявляються в ІФА, можуть персистувати протягом року. При досить песимістичному відношенні до створення засобів специфічної профілактики РРСС з`являються передумови вирішення даного питання. Так виданий патент ЕРА 95200877.9 Akzo Nobel (Нідерланди) на європейські штами вірусу репродуктивного респіраторного синдрому свиней, які використовуються для створення вакцин. Про механізм розвитку імунітету відомо вкрай мало. В Англії також ведеться розробка вакцин.
заходи боротьби. Специфічних засобів лікування при РРСС немає. Відсутні також засоби специфічної профілактики. Лабораторна діагностика хвороби утруднена насамперед через необхідність проведення великого спектра диференціальних діагностичних досліджень. Тому при виникненні хвороби в раніше благополучній країні необхідне прийняття рішень проблеми в національному масштабі: повністю заборонити вивезення свиней, туш і гною з підозрілих ферм і свінохозяйств- накласти обмеження по пересуванню свинопоголів`я протягом 8 тижнів після останнього випадку одужання. Свинопоголів`я, призначене на експорт, треба перевозити в спеціально обладнаних транспортних засобах. Підозрілий інфікований матеріал (плаценту, плоди і мертвонароджених поросят) необхідно знищувати. Прибирати, дезінфікувати приміщення та місця опоросу свіноматок.Обязательно повинні бути дезінфікувати килимки на вході свинарських приміщень.
Ветеринарно -санітарная оцінка продукції в нашій країні не розроблена.
Увага, тільки СЬОГОДНІ!
Поширення хвороби. В даний час можна говорити про панзоотій РРСС, хоча багато ще не відомо про її світовому поширенні. Багато країн не можуть лабораторно діагностувати хворобу або не хочуть повідомляти про її появу. На американському континенті про хвороби повідомляли США і Канада. У США існують чіткі статистичні дані через хворобу. Є дані про її наявність в 19 штатах. Моррісон з співр. повідомили про ретроспективному виявленні 364 стад тварин, що позитивно реагують на РРСС на підставі серологічних досліджень тільки в 7-ми свинарських штатах (Айова, Іллінойс, Індіана, Мічиган, Небраска і Північна Кароліна). У Канаді повідомлення підтверджені серологічно в 2-х штатах: Онтаріо і Квебек. В Європі найбільше поширення хвороби відзначали в свинарському поясі, що охоплює західні землі Німеччини, Нідерландів та Бельгії. У Бельгії найбільшу кількість спалахів хвороби реєстрували в квітні 1991 р свинарських господарствах Франції РРСС - нове захворювання, яке викликається у свиней новим вірусом. Виявляється різноманітної сімтоматологіей і супроводжується абортами, мертвонародження і загибеллю поросят, а також на грипоподібні проявами. У Франції РРСС реєстрували на 169 племінних фермах в період з листопада 1991 року по травень 1992 року, головним чином, в провінції Бретань. В Англії хвороба з`явилася в травні 1991 року і широко поширилася в графствах Хамберсайд і Північному Йоркширі, а в подальшому і в Шотландії. Хвороба реєструвалася також в Данії, Іспанії, Голландії та НАО. Мальта виявлені специфічні AT до збудника в пробах крові свиней, що надійшла в діагностичні центри Європи з Італії та Польщі.
Відомості про збудника. Голландським вченим Wensvoort і Terpstra (Центральний ветеринарного інституту г Лелистад) вдалося встановити справжню етіологічну природу цієї хвороби, виділивши вірус, який назвали "агент Лелистад", в культурах легеневих макрофагів свиней. В даний час встановлено, що збудником хвороби є РНК-вірус, який входить в рід артерівірусов.
Морфологія і хімічний склад. Збудник хвороби РНК-вірус розміром 45-65 нм. Він має зовнішню оболонку і чутливий до ліпідним розчинників. За фізико-хімічними властивостями нагадує представників сімейства тогавирусов, роду артерівірусов (вірус артеріїту коней). Віруси РРСС, виділені в Європі (агент Лелистад) і в США (VR-2332), дещо відрізняються за біологічними властивостями, хоча і мають перехресні серологічні зв`язку.
У культурах легеневих макрофагів вірус РРСС викликає ЦПД у вигляді округлення клітин з наступним пікнозом і відділенням від моношару протягом 2-4 діб. Вірус містить РНК і оболонку, здатний реплицироваться в макрофагах і проходити через плаценту, заражаючи плід, може тривалий час персистувати в організмі тварини і викликати повторно імуносупресію. Передається при прямому контакті і респіраторно. Швидко розповсюджувався на фермах. Вірус РРСС проникає трансплацентарно, на що вказує виявлення збудника і специфічних AT у мертвонароджених плодів і живих ослаблених поросят до першого прийому молозива. Plagemann (1992) передбачає, що вірус РРСС належить до нової групи вірусів, що нагадують тоговіруси, але має позитивно закручену РНК і за структурою схожих з корона- і торовірусамі.
Стійкість. Вірус чутливий до зміни рН среди.Оптімум рН від 5 до 7. Benfield et Welson (1992) повідомляли, що вірус SIRS, виділений в США, зберігає інфекційність в гомогенатах уражених легких при-70 ° С протягом 1,5 років, при + 4 ° С - 1 міс, при 37 ° С - 2-х діб. При температурі 55 ° С він інактивується протягом 45 хв. Friey et.al. (1992) виділили вірус з патматеріалу, що зберігався протягом 3-х років в замороженому стані.
AT властивості. Обстежено 4 свинарські ферми на наявність ATк вірусу РРСС за допомогою ІФА протягом 12 тижнів після опоросу. Титр AT у свиноматок зіставляли з титром материнських AT у поросят у віці 2 нед.Матерінскіе AT, виявляли у поросят протягом 4-10 тижнів. ВНА виявили через 12 днів після зараження або 18 днів після контакту з хворими тваринами. Максимальних титрів вони досягали на 40-50-у добу після зараження і зберігалися до 120 днів (термін спостережень).
Культивування. Вірус РРСС успішно репродукується в легеневих альвеолярних макрофагах (АМФ) поросят. Для отримання АМФ використовують 4-6-тижнів поросят, вільних від патогенної мікрофлори ферм. АМФ виділяли 2-кратним промиванням відпрепарованих і ізольованих легких забуферений фізрозчином, що містить антибіотики (пеніцилін, стрептоміцин, неоміцин і амфотерицин), який нагнітали через трахею за допомогою автоматичного шприца з голкою (близько 500 мл). Вибір рідини з легенів, що містить АМФ, проводять зазвичай шприцами через той же отвір. Суспензію клітин з легких центрифугировали при 1500 обор. - 15 хв. При наявності еритроцитів до осаду додавали 0,83% -ний розчин хлориду амонію і після 5-хв інкубації при кімнатній температурі клітини знову центрифугують при тих же умовах. Зараження вірусом РРСС проводили через 2-24 годин після 2-кратної відмивання живильним середовищем і антибіотиками. Облік цитотоксичної дії вірусу проводять через 24, 48, 72, 96 і 120 ч. Культуральне рідина використовують в якості AT ELISA. Титр макрофагального вірусу становив 1: 8-1: 16. Таким чином, АМФ можуть бути використані для препаративної напрацювання вірусу в дослідницьких цілях, виготовлення діагностикумів та виявлення вірусу в патологічних матеріалах.Чувствітельнимі до вірусу РРСС є первинна культура АМФ свиней і клон клітин MARC-145 (клонових варіант, отриманий з перещеплюваної культури клітин МА 104 нирки африканської зеленої мавпи). Максимальне накопичення вірусу відзначали при посівної концентрації 100-120 тис. Клітин / 1 мл з використанням фетальної сироватки і зняття моношару не пізніше 3-4-х діб.
Клінічні ознаки і патологоанатомічні зміни. У свиноматок хвороба починається з тимчасової відмови від корму або гіршою його поїдання. У період абортів відзначають як підвищену до 41,5 ° С, так і знижену температуру тіла. У окремих тварин спостерігають респіраторні порушення і у 1-5% - блакитно-червоне забарвлення шкіри вух, п`ятачка і вульви. Суттєвою ознакою захворювання супоросних свиноматок періоду, близького до опоросу, є аборти і передчасні опороси, що виникають через 2-3 тижнів після виявлення перших симптомів хвороби. За даними англійських вчених, уражені свині на першій стадії хвороби виявляють ознаки інфлюенци, зокрема, високу температуру тіла і важке дихання. Пізніше яскраво-червоні плями з`являються по всьому тілу свині. Через деякий час забарвлення плям змінюється, і вони набувають синій колір. У перші 2 тижні хвороби аборти можуть становити 60-70%, через 3 тижні - 50 і через 18 тижнів - 10%. У природних умовах клініка може значно варіювати від стада до стада і не корелювати з основною вагою репродуктивних порушень. В окремих господарствах кількість абортованих свиней на останній стадії супоросності досягає 100%.
При аналізі 214 уражених господарств в окрузі Мюнстерленд в Німеччині встановлено, що 37% абортів сталося на 100-112 дні, 49% -на 113 дні 14% - на 117-120 дні поросності. Якщо розглядати крайні межі нормальної поросності в 113-117 днів, то запізнілі опороси до 120 днів можуть свідчити про загибель плодів в більш ранньому періоді, обумовлених іншими інфекціями свиней з репродуктивним синдромом, такими як парвовірусна або ентеровірусна. Однак, як правило, муміфікації плодів при гострому перебігу РРСС не спостерігається. В окремих випадках у свиноматок спостерігали залеживанием, хитку ходу, параліч задніх кінцівок або косу постановку голови. Загибель свиноматок не перевищує 2%. Після абортів свиноматки досить швидко одужують і тільки в окремих з них відзначали "післяпологові перейми". Свиноматки повторно приходять в охоту, проте повідомляється про подовженому терміні холостого періоду. У свиноматок, опоросившихся в оптимальні терміни поросності (114,7 ± 1,7 дн) в гострому періоді хвороби до 100% поросят можуть бути мертвонародженими Німецькі автори, опрацювавши велику кількість статистичних показників уражених господарств, встановили, що від хворих свиноматок в пометах налічували 30 -40% мертвонароджених, 30% слабких і 30% зовні здорових поросят. У мертвонароджених поросят спостерігали випуклообразную форму голови, кон`юнктивіти і ураження рогівки очей, підшкірні набряки. Слабкі поросята масою до 1 кг видають страхітливий вереск і стогони, задні кінцівки їх часто витягнуті, і вони не можуть нормально встати на ноги. При хронічному перебігу спостерігають відносний добробут супоросних маток. Через 1-1,5 місяця можливе народження на неблагополучній фермі здорових поросят, але через деякий час знову відзначають аборти. У відгодівельних господарствах хвороба протікає з рядом особливостей: основні клінічні ознаки пов`язані з ураженням органів дихання.
При розтині спостерігають крововиливи і набряки підшкірної клітковини, збільшений вміст рідини в перикардіальної і черевній порожнинах, дистрофію печінки і зміни в легенях. Вони кровенаполнена і частіше мають мозаїчну забарвлення. Слаборозвинені поросята, як правило, гинуть в перші тижні життя. Через 4-6 тижнів захворювання починає набуває хронічного теченіе- спостерігається затримка росту і розвитку, а також підвищена чутливість до секундарная інфекцій. У окремих тварин відзначали негнійний енцефаліт і міокардит. Правда, у більшості поросят їх не виявляли. В цілому патолого анатомічні ознаки не характерні і нагадують такі при бактеріальних інфекціях. У маток з ураженням вух ознак міокардиту не спостерігалося. У хворих тварин в США відсоток ураження серцевого м`яза значно вище, ніж в Німеччині. Нерідко хвороба протікала в змішаній формі, одночасно з грипом, БА, парвовирусной інфекцією.
Експериментальна інфекція. Terpstra і ін .. (1991) проводили досліди по зараженню культуральним вірусом РРСС 8-ми свиноматок на 84-й дн поросності. Тільки у 2-х свиноматок спостерігали 1-дн підвищення температури тіла до 39,6 ° С. У 2-х - почервоніння шкіри вух і прискорене дихання. Одна свиноматка абортованих на 10-й днів поросності і принесла 7 мертвих і 4 живих слаборозвинених поросят. Дві інші опоросились на 116-й і 117-й дн поросності і в пометах виявили 10 живих і 19 мертвонароджених поросят, з яких 5 були муміфікованими Решта 5 свиноматок опоросились на 113-115-й дн поросності без репродуктивних порушень. У пометах було 58 поросят, багато з яких були слаборозвиненими і 26 з них (40%) впали протягом 1-го тижня життя Вірус РРСС було виділено від 31 поросяти (30% інфікованості). При інтратрахеально і внутрішньом`язовому заражених на 2-5-е добу у інфікованих підсвинків спостерігалось незначне (на 0,5-1,5 ° С) підвищення температури тела.У 2-х тварин на 10-12-й день після зараження відзначений кашель. Інших клінічних ознак хвороби не виявлено. Підвищення кількості лейкоцитів в крові було встановлено через добу після зараження тварин і до 4-го дня їх рівень досягав 28-30 тис / мл і зберігався протягом 2-3 тижнів. У підсвинка, який перебував в контакті з зараженими тваринами, підвищення температури тіла відзначено на 18-19-е, а збільшення числа лейкоцитів на 6-ту добу після спільного змісту. На 5 і 14 день після зараження було вбито по одній тварині. При патологоанатомічному дослідженні у них спостерігалися поодинокі вогнища гострої бронхопневмонії. В обох випадках з легких і легеневих альвеолярнихмакрофагів виділено вірус РРСС. В інших внутрішніх органах піддослідних тварин видимих змін не виявлено. При інтраназальному зараженні вірус містить суспензією поросят 4-тижнів віку температура тіла їх підвищувалася до 40,5 ° С, утримуючись на цьому рівні 3 дн, зазначалося прискорене дихання, відмова від корму і загальне пригнічення Підшкірне і внутрішньом`язове введення віруссодержащего матеріалу не викликало у дорослих білих мишей ніякої видимої реакції. Однак та ж суспензія після внутрішньомозкового введення білим мишам викликала поява нервнопаралітичну ознак і їх загибель. З 3-го пасажу загибель мишей наступала через 24 год Вірус № 9-181-93, адаптований до білих мишей, викликав специфічне ЦПД. У 1995 р в Курській області було виділено вірус РРСС, який не викликав ГА еритроцитів і Гад. У тварин, заражених європейським стандартним шт "Лелистад" вірусу РРСС клінічних ознак не відзначалося.
Епізоотологічне характеристика. З епізоотичної точки зору важливим є шлях поширення інфекції. Зокрема, в грудні 1990 р хвороба зареєстрована в Нідерландах. Свинарство в цій країні - одне з найбільш концентрованих в світі, і природно, хвороба дуже швидко поширилася респіраторним шляхом, цілком можливо, в потоках повітря. Імовірно, факторами передачі збудника могли бути і птиці, а також люди і автомобілі (якщо ці об`єкти були в контакті з інфекційним агентом).
Більшість сільськогосподарських виставок та ярмарків з продажу свинопоголів`я в 1991 р в Великобританії були заборонені. За даними Держветслужби цієї країни в даний час немає доказів поширення хвороби повітряним шляхом, і всі випадки занесення збудника пов`язані з пересуванням поросят. Вірус може персистувати в заражених стадах свиней до півроку. Це може бути пов`язано з відсутністю сероконверсии у окремих явно інфікованих тварин. Окремі заражені свиноматки можуть бути джерелом зараження для здорових тварин протягом 99 днів. Англійські дослідники вважають, що стада свиней залишаються зараженими протягом 2-х місяців після припинення появи явних клінічних ознак хвороби. Зазначене прямо пов`язано з виробничими показниками уражених РРСС племінних ферм свиней. На невеликих фермах на 50-200 свиноматок в період гострого перебігу хвороби недоотримують понад 50% поросят.
У нашій країні в 1991-1993 рр. в ряді господарств виявлено масові випадки абортів, народження мертвих і слабких поросят, респіраторні розлади. У 1993 г.в Голландію було направлено 40 проб сироваток крові від свиноматок з порушеннями репродуктивної функції з 10 господарств для дослідження на наявність AT до вірусу репродуктивного та респіраторного синдрому. У всіх 10 обстежених господарствах виявлені позитивно реагують свиноматки. З 40 досліджених проб сироваток крові 38 виявилися позитивними, причому більша частина сироваток (72,5%) містила специфічні AT в високих титрах (1: 640 і вище). Високий відсоток позитивних сироваток свідчить про широку циркуляції вірусу в досліджуваних свинарських господарствах. Вірус РРСС, ймовірно, має імунодепресивними властивостями. Американськими дослідниками встановлено зменшення числа альвеолярнихмакрофагів і порушення їх функції уінфіцірованних поросят. Макрофаги відіграють важливу роль в індукції AT освіти-вони передають агент Т-і В-лімфоцитів. Розвиток респіраторного синдрому, мабуть, обумовлено вторинними бактеріальними інфекціями після розмноження вірусу в альвеолярних макрофагах і порушення імунної системи легень.
діагноз на РРСС ставлять на підставі клініко-епізоотологічних даних і результатів лабораторних досліджень. Для виділення вірусу використовують сироватку або плазму крові хворих і полеглих поросят, проби легень, селезінки, плевральної і перикардіальної рідини. Виділення вірусу проводять в культурах альвеолярнихмакрофагів, отриманих від молодих (6-8 тижнів) СПФ-поросят. Успіх голландських вчених і пояснюється перш за все тим, що вони використовували цю культуру, в той час як культури клітин РК-2, РК-15 і К-6 виявилися не чутливими для виділення збудника. Ідентифікацію збудника проводять за фізико-хімічними серологічним властивостям. З серологічних методів використовують спочатку непрямий метод ІФ і прямий метод ІФА В США для ідентифікації збудника використовували РН, розроблену з цим вірусом в університеті штату Міннесота, а також ІФ та ІФА, розроблені в національній лабораторії Ames в шт. Айова. У Франції розроблений непрямий метод ІФА для виявлення специфічних AT.Сероконверсія в діагностичних титрах (1:20 і вище) розвивається до 14-му та після експериментального інфікування, а до 28-му дн титри антитіл накопичуються до 1: 1280. Розроблено методику очищення і концентрування культурального вірусу РРСС, репродукованого в культурі клітин МАРС-145 і FL.Предварітельно віруссодержащего суспензія очищається від баластних білків низькошвидкісним центрифугуванням, потім концентрується 2-кратним осадженням ПЕГ мовляв м. 6000 і очищається високошвидкісним центрифугуванням (7000 хв-1 в протягом 6 год). У градієнті щільності CsCl-сахарози матеріал концентрували в 100 разів. Очищення становила 96,5%. Всі етапи підготовки препаратів контролювали за активністю в ІФА. Високо специфічні активні препарати АГ вірусу РРСС використовують для виготовлення AT діагностикумів для ІФА. Метод непрямої ІФА простіший і його можна використовувати в польових условіях.Достаточно досліджувати з стада 10 проб сироваток, (краще парних), щоб суверенністю поставити лабораторний діагноз.
В Англії практикується збір з 12-15 пар сироваток від підозрюваного стада. Служба діагностики на РРСС в цій країні діє з квітня 1992 р Досліджено вже 118 стад і було виявлено 31 стадо, позитивно реагує на РРСС. При серологічному дослідженні хибнопозитивні реакції, як правило, відсутні, хоча хибнонегативні є звичайними і досягають 25%. Benfieldet. al. (1992) повідомляли про використання монАТ в ІФ при ідентифікації європейських, американських і канадських штамів збудника РРСС. У РФ розроблений твердофазний ІФА, для проведення діагностики РРСС, складені набори діагностикумів для виявлення РРСС і специфічних AT. МонАТ до вірусу РРСС можуть бути використані як для виявлення АГ вірусу РРСС в патологічному матеріалі, так і для визначення AT в сироватках крові свиней, так як вони дають більш специфічну реакцію в порівнянні з поліАТ.
При диференціальної діагностики необхідно виключити вірусні та бактеріальні хвороби, що протікають з порушеннями в репродуктивних системах, а також отруєння. Виключають насамперед АЧС, КЧС, БА, грип свиней, ЕМК, ПАРВОВІРУСНИЙ хвороба, ТГЕ, лептоспіроз і хламідіоз. Характерною особливістю цієї хвороби є загострення вторинних і хронічно протікають інфекцій, збудники яких можуть таємно циркулювати в уражених стадах свиней. Це ще більше ускладнює проведення лабораторної диференціальної діагностики.
імунітет. Після того, що хворіє більша частина свиноматок виявляються імунними до повторного інфікування. AT до вірусу РРСС, які виявляються в ІФА, можуть персистувати протягом року. При досить песимістичному відношенні до створення засобів специфічної профілактики РРСС з`являються передумови вирішення даного питання. Так виданий патент ЕРА 95200877.9 Akzo Nobel (Нідерланди) на європейські штами вірусу репродуктивного респіраторного синдрому свиней, які використовуються для створення вакцин. Про механізм розвитку імунітету відомо вкрай мало. В Англії також ведеться розробка вакцин.
заходи боротьби. Специфічних засобів лікування при РРСС немає. Відсутні також засоби специфічної профілактики. Лабораторна діагностика хвороби утруднена насамперед через необхідність проведення великого спектра диференціальних діагностичних досліджень. Тому при виникненні хвороби в раніше благополучній країні необхідне прийняття рішень проблеми в національному масштабі: повністю заборонити вивезення свиней, туш і гною з підозрілих ферм і свінохозяйств- накласти обмеження по пересуванню свинопоголів`я протягом 8 тижнів після останнього випадку одужання. Свинопоголів`я, призначене на експорт, треба перевозити в спеціально обладнаних транспортних засобах. Підозрілий інфікований матеріал (плаценту, плоди і мертвонароджених поросят) необхідно знищувати. Прибирати, дезінфікувати приміщення та місця опоросу свіноматок.Обязательно повинні бути дезінфікувати килимки на вході свинарських приміщень.
Ветеринарно -санітарная оцінка продукції в нашій країні не розроблена.
Гамборо хвороба