Ефективність впливу озону на перебіг перитоніту

Ш. Юсупов, У.Т. Суванкулов, Ж.А. Шамс, А.К. Шахрая, Б.Л. Давронов

Останнім часом в медицині став, широко застосовується озон [4, 5, 6]. Однак практично немає робіт, присвячених впливу озону на перебіг перитоніту іспайкообразованія.

Метою нашого дослідження було вивчення впливу озону на розвиток перитоніту і спайкообразования в експерименті.

МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ

Експериментальні дослідження проводилися на 38 білих щурах породи Вістар, масою 140-160 г. Моделювання гострого розлитого перитоніту проводилося пометодіке І.М. Байбекова і В.А. Хорошаєва (1991) [7, 8].

Щури були розділені на 2 групи по 19 в кожній. Тваринам 1 (контрольної) групи, після розвитку у них розлитого перитоніту, проводилася средіннаялапаротомія і осушення черевної порожнини від гною стерильними серветками. У ніжнемуглу рани залишали полихлорвиниловую трубку і ушивали черевну порожнину.

Тваринам 2 групи, після осушення черевної порожнини від гною, її обдували сухий озоно-кисневої сумішшю протягом 3-х хвилин. Озоно-кисневу суміш получаліпрі допомоги апарату ОТРИ-01, концентрація озону 5,8 мг / л. У них, такжеоставлялі дренажну трубку і ушивали черевну порожнину.

На 2 і 3 добу після операції пацюкам 2 групи через дренажну трубку в черевну порожнину вводили по 10 см³ сухий озоно-кисневої суміші жеконцентраціей озону, після чого у тварин обох груп видаляли дренажниетрубкі.

На 3, 7 і 14 добу після операції тварин виводили з експерименту шляхом миттєвою лекапітаціі. Світлооптичних і Електронномікроськопічеськие ісследованіюподвергалісь зразки сальника, діафрагмальної частини очеревини, тонкого кішечнікас брижі і спайки.

Препарати для светооптического дослідження готувалися по загальноприйнятої методиці.

Для трансмісійної електронної мікроскопії (ТЕМ) матеріал, фіксований в 2,5% розчині гдютарового альдегіду на 0,1 М фосфатному буфері (рН-7,2) і в 1% розчині чотириокису осмію, після дегідратації і просочення заливали в смесьепона і аралдіта. Напівтонкої і ультратонкі зрізи виготовляли наультрамікротоме "Reichert Jung" (Reichert, Австрія) і фарбували, відповідно, метиленовим синім і основним фуксином або уранілацетатом іцітратом свинцю (Каруп В.Я., 1986). Ультратонкі зрізи досліджували велектронном мікроскопі Н-600 (Hitachi, Японія).

Для скануючої електронної мікроскопії (СЕМ) зразки після дегидротации висушували методом критичної точки в апараті "НСР-2" (Hitachi, Японія). З частини матеріалу, залитого в смолу, робили зрізи товщиною 6-8 мкм.Іх наклеювали на покривні скла або алюмінієву фольгу, і після удаленіясмоли в насиченому розчині гідроксиду натрію висушували в абсолютному етанолі, напилювали золотом і досліджували в СЕМ.

Через 3 дні після операції у тварин контрольної групи макроскопически петлі кишечника роздуті, є каламутний випіт, поверхню очеревини тьмяна сгнойнофібрінознимі накладеннями. Відзначається наявність вираженого спаечногопроцесса. Спайки легко рвуться і розташовані переважно між петлямітонкой кишки.

При гістологічному дослідженні в великому сальнику виявлені набряк і виражена поліморфно-клітинна інфільтрація, з переважанням Поліформна-ядернихнейтрофільних лейкоцитів. Судини розширені, в просвіті багатьох з них тромби.Аналогічная картина має місце в брижі тонкої кишки і діафрагмальної частібрюшіни.

Скануюча електронна мікроскопія (СЕМ) очеревини показує різке розширення міжклітинних щілин, і навіть розбіжність мезотеліоцітов. Наповерхні мезотелия розташовуються пасма фібрину, перитонеальні макрофаги ітучние клітини. Поверхня багатьох мезотеліоцітов з невеликими ерозіями.

Трансмісійна електронна мікроскопія (ТЕМ) показує виражене розширення просвіту мікросудин. Цитоплазма ендотеліоцитів виливаючи, вакулізірована. Під мезотеліоцітов визначається скупчення транссудату.

При гістологічному дослідженні спайок встановлено, що їх основу становить пухка сполучна тканина, що складається з ніжних колагенових волокон, міжякими розташовуються фібробласти. Є також макрофаги і лімфоідниеклеткі.

При електронно-мікроскопічному дослідженні спайок їх поверхню місцями вистелена мезотеліоцітов довгастої форми, апикальная поверхню которихвибухает в просвіт черевної порожнини. На поверхні цитоплазматичної мембраниклеток є велика кількість мікроворсинок.

Через 7 діб після операції в черевній порожнині кількість випоту зменшується. Набряклість очеревини збережена, мають місце міжкишкові абсцесси.Спаечние процес поширений по всій черевної порожнини. Спайки преімущественнорасполагаются між петлями тонкої кишки, вони більш грубі.

Світлооптичних дослідження очеревини показали, що запальні зміни менш виражена, рідше зустрічаються розширені судини з тромбами. Обнаружіваютсяучасткі очеревини з порушеною мезотеліальної вистиланням.

СЕМ і ТЕМ дослідження показують, що в зонах з порушеною мезотеліальної вистиланням, мезотелеоціти мають уплощенную форму з досить великими ядрами іядришкамі. У цитоплазмі клітин зустрічаються нечисленні мітохондрії іпрофілі зернистої ендоплазматичної мережі.

При гістологічному дослідженні встановлено, що основу спайок становить пухка сполучна тканина, що складається з тонких пучків коллагенових` волокон, між якими розташовуються фібробласти і нечисленні кровеносниекапілляри. Фібробласти мають довгасту форму, ядра їх великі, гіперхромние.Кровеносние судини вистелені ендотеліальними клітинами з овальними ядрами. Состорони вісцеральної очеревини в товщу спайок вростають гладком`язові клітини, джерелом яких є середня оболонка кишки. Крім вишеопісаннихструктур в товщі спайок виявляються нечисленні макрофаги, лімфоцити іедінічние нейтрофільні лейкоцити. Поверхня спайок вистелена мезотеліальниміклеткамі.

На 14 добу в черевній порожнині є випад в незначній кількості, в ряді випадків виявляються інкапсульовані міжкишкові абсцесси.Мікроскопіческая мезотеліальної вистилання очеревини відновлює своюцелостность. Однак клітини залишаються набряклими, куполоподібної ізмененнимі.Ендоплазматіческая мережу зерниста і вакуолізірована. Розширення капілярів, явища стазу і сладжування еритроцитів виражені в меншому ступені.

Спайковий процес в черевній порожнині залишається вираженим. Спайки грубі, різної форми в деяких місцях вони перетискають петлі кишечника. Прігістологіческом дослідженні спайок відзначається збільшення содержаніяколлагенових волокон, пучки їх більш товсті і грубі, кілька уменьшаетсясодержаніе фибропластов. Останні приймають витягнуту форму з удліненниміядрамі. Виявляються макрофаги, поодинокі лімфоцити і гладком`язові клеткі.Поверхность спайок вистелена сплощеним мезотелеонітамі.

У контрольній групі падіж тварин становив 52,6%

У другій групі тварин, яким застосовувався озон, на 3 добу після операції в черевній порожнині макроскопічно розташування петель кишечника ненарушено, наявний випіт напівпрозорий і в невеликій кількості. Брюшінаслегка потовщена, гладка, на її поверхні визначаються нечисленні прядіфібріна. Відзначається наявність лише одиничних тонких, коротких спайок, коториелегко рвуться і не деформують кишечник.

Світлооптичних дослідження показали, що запальні зміни виражені в значно меншому ступені. Цілісність мезотеліальної вистилання менеенарушена, ніж у тварин контрольної групи. Поодинокі утворилися спайкіпредставлени ніжними пучками колагенових волокон і фібробластів. Едінічниеобразовавшіеся спайки представлені ніжними пучками колагенових волокон іфібробластамію. Тут не зустрічається гладком`язових клітин.

На 7 добу макроскопічно очеревина чиста, блискуча, випоту немає. Є 1-2 спайки, які легко рвуться і не деформують кишечник.

При світлооптичному дослідженні різних відділів очеревини відзначається невелика інфільтрація поліморфно-клітинними елементами з домінірованіемлімфоцітов. Виявляються незначні переваскулярних інфільтрати іумеренное потовщення стінок судин без тромбів. У стінці тонкої кишки умереннаяінфільтрація виявляється лише в стромі ворсинок і між ними. Ворсінкіправільной форми без десквамації клітин. У епітеліальної вистилки ворсінокпреобладают призматичні клітини.

Серозна оболонка тонкої кишки без виражених ознак запалення і пошкодження. Кровоносні судини мають звичайну структуру.

СЕМ і ТЕМ також свідчать, що озонотерапія призводить до значної редукції патологічних змін ультраструктур, викликаних експеріментальнимперітонітом. На поверхні мезотеліоцітов визначаються довгі і тонкіемікроворсінкі. У цитоплазмі мезотеліоцітов розташовуються довольномногочісленние мітохондрії і поодинокі профілі зернистої ендоплазматіческойсеті. Підлягають судини помірно розширені. Ендотелеоціти з рівною просветнойповерхностью і вузькою цитоплазмою.

Основу спайок становить пухка сполучна тканина, представлена тонкими, рихло розташованими колагеновими волокнами, фібробластами і кровеноснимікапілярамі. У порівнянні з аналогічним терміном в контрольній групі чіслофібробластов і кровоносних капілярів істотно нижче.

На 14 добу макроскопічно в черевній порожнині випоту немає, очеревина чиста, петлі кишечника лежать вільно. Виявлені поодинокі спайки короткі, тонкі, легко рвуться. У 78,9% тварин спайки не виявлені. Світлооптичних, СЕМ і ТЕМісследованія показали, що очеревина має звичайну структуру.

Будова спайок істотно відрізняється від такого в контрольній групі, в наявності ознаки, що вказують на зниження синтетичної активності фібробластів: розміри клітин зменшені, знижено їх кількість, зміст коллагеновихволокон також зменшено.

Наші дослідження показують, що застосування озону є досить ефективним при експериментальному перитоніті і зменшує інтенсивність процессаспайкообразованія. Озон може бути рекомендований в клінічній практиці длялечения і профілактики аналогічної патології.

ЛІТЕРАТУРА

1. Баїра Г.А. Спаечная непрохідність кишечника. // В кн., Термінова хірургія дітей ,, Санк-Петербург, 1997. С. 189-200

2. Баїра Г.А. Рошаль Л.М. Гнійна хірургія у дітей / М. -1991 с. 41-48

3. Женчевскій В.А. Спайкова хвороба -М. : Медицина. 1989, стор. 10-15.

4. Перетягін С.П. Озонотерапія // Методичні рекомендації. Н. Новгород. -1996 с.14

5. Сеппо А. і співавт. Окислювальні препарати і озон як дезінфіцурующіе і антибактеріальні засоби. Таллінн, -1996 Том 1, с.73-78.

6. Салімов Ш.Т. і співавт. Озонотерапія в комплексному лікуванні гнійно-запальних захворювань у дітей. // Актуальниевопроси дитячої хірургії. Республіканський збірник наукових праць. Андижан, -1997, с. 157-160.

7. Хорошаев В.А. Байбеков І.М. Ворожейкін В.М. Морфологія мезотеліацітов капсули печінки в нормі і при експеріментальномперітоніте. // Бюлетень експериментів біології і медіціни.-1988, -№ 9, с.374-377.

8. Хорошаев В.А. Патоморфологічні особливості очеревини при гострому розлитому перитоніті. // в кн. "Перитоніт", - Новосибірськ, -1994 с. 34-36.

9. Цуман В.Г. Машков А.Є. Косарєв В.А. та ін. // Хірургія. -1994. -№ с.23-25